Application of fluorescein copolymer to improve the efficiency of counter-immunoelectrophoresis for diagnostics of animal infectious diseases: ст.

Abstract

Концентрація великої кількості тварин в обмеженому просторі через промислові технології утримання тварин створює проблеми швидкого розвитку та поширення різних інфекційних захворювань як бактеріального, так і вірусного походження. У разі виникнення інфекційних захворювань важливо проводити термінову експрес-діагностику з метою встановлення збудника та негайної розробки ефективних заходів ліквідації та профілактики інфекції. Контрімуноелектрофорез (КІЕ), імунофлуоресценція (ІФ), твердофазна гемадсорбція (SPHA) та інші тести використовуються для швидкої діагностики вірусних інфекцій. Серед цих методів, КІЕ не вимагає дорогого обладнання та тривалого навчання персоналу; вона проста та швидка у виконанні [1, 2]. КІЕ базується на реакції преципітації для виявлення специфічних антитіл проти збудника. Відомо, що преципітуючі антитіла, більшість з яких належать до імуноглобулінів класу G (IgG), за певних умов електрофорезу в електричному полі рухаються до катода. Контрімуноелектрофорез (КІЕ) – це високоспецифічний, простий та швидкий метод, який не потребує дорогого обладнання, вхідних матеріалів та тривалого навчання персоналу порівняно з іншими експрес-методами діагностики вірусних інфекцій. Незважаючи на високу інформативність КІЕ, результати на практиці можуть бути часом сумнівними. Тому метою дослідження було вдосконалення методу КІЕ шляхом посилення взаємодії антиген-антитіло з використанням синтезованого амфіфільного флуоресцеїнвмісного кополімеру. Було продемонстровано, що використання комплексу флуоресцеїн-кополімер-антиген посилило взаємодію з сироватковими/плазмовими антитілами кроликів, імунізованих проти геморагічної хвороби, та збільшило вміст білка в зоні преципітації. Цей ефект був більш вираженим, коли в комплекс з антигеном вводили більше гідрофобного кополімеру, що містить 5,87% флуоресцеїну. Здатність амфіфільного флуоресцеїнового кополімеру посилювати взаємодію антиген-антитіло та здатність візуалізувати зону флуоресцентної преципітації може підвищити ефективність КІЕ для експрес-діагностики інфекційних захворювань.